预制胶常见问题大汇总

问题现象

问题描述

解决方案

凝胶出现裂痕和气泡现象

在运输或保存过程中凝胶可能受到低温影响结冰，凝胶中的水分结冰膨胀，产生气泡和裂纹结冰。

注意:收到货后第一时间查看，保存时不要放在冰箱侧面或出风口附近。

凝胶底部胀出

不影响电泳结果，无需剪除。胀出部分在染色脱色后会复原。若剪除，底部会缺失一部分。

凝胶梳孔下沉，底部凝胶下沉露出

可能是在物流运输过程中摔落导致凝胶整体偏移，不能使用。

漏样

1.凝胶干燥

2.加样不当：枪头加样时撑开塑料胶盒，导致凝胶与胶盒分离。

3.胶条插入问题预制胶扭曲导致凝胶与胶盒分离。

拔出梳子后，加样孔变形

尽量在电泳缓冲液中轻缓平直拔出梳子，防止负压使梳齿歪斜。另外，可以用针头挑正。

电泳过程中出现气泡

电泳产热过高导致，可降低

电泳温度。

电泳时条带呈弧线

漏液，伯乐电泳槽的U型密封条未翻转导致漏液

电泳时条带出现异常

电泳缓冲液和预制胶的体系不匹配

溴酚蓝带变黄

电泳过程中产热过多导致凝胶局部过热、变性或降解，降低电压，冰浴，电泳配置新鲜电泳缓冲液。

经过一段时间电泳后，上样孔内有残留样品

1.样品蛋白浓度过高

2.样品中的不溶物可能导致上样孔底部残留物

预制胶蛋白条带弥散，marker存在弯曲。

1、蛋白样品上样量过大。

2、电泳时间过长。

测量蛋白样品浓度，重新调整上样量。按照说明书推荐的电压进行电泳。

电泳条带不规则、边缘翘起

1、蛋白样品有杂质。

2、加样时样品在梳孔中分布不均匀。

3、梳孔倒伏

蛋白样品涡旋后进行离心，小心吸取上清，上样时尽量避免从梳孔的一侧加样，造成样品堆积，及时用针头调整梳孔

溴酚蓝带下存在透明的条带

透明条带为溴酚蓝带，继续电泳或多脱色两遍就可以去除。

电泳条带呈点状或线状

样品中甘油含量过低，导致样品上样时无法正常下沉

拖尾

1. 蛋白在提取的时未加蛋白酶抑制剂。

2. 实验温度过高，蛋白降解。

条带有重影

样品浓度过高，建议降低上样量。

电泳后，凝胶表面凸起

1. 烧胶。表现为溴酚蓝带由蓝变黄，同时凸起位置染色脱色后会出现条带扭

2.凝胶存放时间过长。

电泳后，胶里面有白色脂肪斑状物

SDS 低温析出，不会影响电

泳效果。在 25℃环境下可

以正常进行电泳。