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49 人阅读发布时间:2026-05-11 11:21
在生命科学研究领域,蛋白质是生物功能的核心执行者,也是科研人员的重点研究对象。而针对目标蛋白质的准确定量检测,更是相关研究工作中的关键环节。本文将汇总当前主流的蛋白质定量检测方法,与各位科研同仁分享。
一、主流蛋白检测方法原理解析
(一)酶联免疫吸附试验(ELISA)
基于抗原抗体特异性结合与酶促显色反应。将抗原或抗体固定于固相载体,样本中目标蛋白与之结合后,加入酶标记二抗形成免疫复合物。通过酶催化底物显色,吸光度数值与目标蛋白浓度成正比。

(二)多因子检测技术(Luminex)
核心是微球标记与流式检测,实现高通量多指标同步检测。不同荧光编码的微球偶联对应捕获抗体,与样本孵育后结合目标蛋白。再加入荧光标记的检测抗体,通过专用设备识别微球编码和检测抗体的荧光强度,完成多种蛋白的定性与定量。
(三)免疫化学发光技术(AlphaLISA)
均相免疫化学发光检测技术,供体微球与受体微球分别偶联捕获抗体和检测抗体,当样本中存在目标蛋白时,会形成三元复合物。供体微球受激发后释放高能氧分子,触发受体微球产生化学发光信号,信号强度与目标蛋白浓度正相关。

二、各检测方法优缺点及局限性
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检测方法 |
优点 |
局限性 |
|
ELISA |
操作简便、成本低、特异性强; 实验室普及率高,满足常规检测需求; 指标覆盖广,满足广泛研究需求; |
通量低,一次仅测一种蛋白; 孵育洗涤步骤多,耗时长; 高浓度样本需稀释 |
|
Luminex |
高通量,同步检测数十种蛋白; 灵敏度高、线性范围宽,节省样本 |
设备成本较高,需专用(luminex)检测仪; 试剂成本较高; 存在交叉反应风险,样本要求高; 可选择指标种类不多 |
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AlphaLISA |
均相检测无需洗涤,操作快速; 步骤简单,方便自动化; 灵敏度极高,抗基质干扰能力强; 线性范围宽,样本可直接检测 |
实验环境要求严苛,易受环境光干扰; 试剂成本较高; 需支持AlphaLISA模块的仪器; 可选择指标种类少 |
三、爱必信蛋白检测试剂盒:性能卓越 品类齐全
(一)核心产品特点
1. ELISA 试剂盒系列
· 常规双抗夹心 ELISA
经典方法,特异性强,SKU超4500,可选指标超2000,适用绝大多数蛋白检测;
样本兼容性广,血清、血浆、细胞上清均可检测;
数据稳定可靠,引用文献丰富。
· Faster ELISA(两步法)
覆盖热门细胞因子;
两步孵育,2.5 小时快速出结果;
直标 HRP 抗体无需 SA-HRP,减少操作误差;
CV 值≤5%-7%,稳定性强,高低丰度样本均能精准检出。
· 竞争法 ELISA(小分子激素类专用)
针对激素、小分子多肽等抗原设计,灵敏度高,可精准检测低浓度小分子物质。
有效解决小分子抗原难以直接检测的问题。
2. HICA 试剂盒(等同 AlphaLISA 技术)
均相免洗涤检测,半小时出结果
6个数量级超宽线性范围,基质干扰小,样本直接检测
Fg级别灵敏度,适配微量蛋白精准定量
适合稀有样本或低丰度蛋白及自动化检测场景。
(二)热卖产品清单
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类型 |
货号 |
产品名称 |
核心优势 |
|
ELISA |
Mouse TNF-α ELISA Kit |
引用文献 106 篇,炎症因子检测优选 |
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|
Human IL-6 ELISA Kit |
引用文献41篇,炎症因子检测优选 |
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|
Human IL-1β ELISA Kit (Faster) |
两步法,2.5h快速检测,速度与灵敏度的完美平衡 |
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HICA |
Human IgG Kit (HICA) |
免洗涤,抗干扰能力强 高灵敏度,微量样本可测 |
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|
Human IFN-γ Kit (HICA) |
四、方法选择指南
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实验需求场景 |
推荐方法 |
选型依据 |
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常规单蛋白检测、经费有限 |
常规双抗夹心 ELISA |
成本低、操作简单,实验室普及率高,满足基础科研需求 |
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快速出结果、追求高效率,灵敏度要求稍低 |
Faster ELISA(两步法) |
2.5 小时完成检测,步骤精简,人为误差低 |
|
小分子激素、多肽检测 |
竞争法 ELISA |
专为小分子抗原设计,检测灵敏度高、特异性强 |
|
低丰度蛋白、微量样本检测、有支持的酶标仪 |
HICA(AlphaLISA) |
超高灵敏度,均相免洗涤,抗基质干扰能力强 |
Absin产品推荐:
多因子检测试剂盒
| 货号 | 名称 | 规格 |
| abs590001 | 人十项炎症因子检测试剂盒(Luminex多因子) | 96T |
| abs50186 | 人十二项细胞因子检测试剂盒(流式荧光发光法) | 96T |
| abs50232 | 人Th1 Th2 Th17因子检测试剂盒(流式荧光发光法)(APC单通道) | 96T |
| abs50231 | 人Th1 Th2细胞因子检测试剂盒(流式荧光发光法)(APC单通道) | 96T |
| abs50234 | 人十四项细胞因子检测试剂盒(流式荧光发光法) | 96T |
| abs50233 | 人炎症因子检测试剂盒(流式荧光发光法)(APC单通道) | 96T |
| abs50236 | 小鼠Th1 Th2 Th17细胞因子检测试剂盒(流式荧光发光法)(APC单通道) | 96T |
ELISA试剂盒:
| 货号 | 名称 | 规格 |
| abs520014 | Mouse CCL5/RANTES ELISA Kit | 96T |
| abs520015 | Mouse GM-CSF ELISA Kit | 96T |
| abs520016 | Mouse CCL2/JE/MCP-1 ELISA Kit | 96T |
| abs520017 | Mouse CXCL1/KC (IL-8) ELISA Kit | 96T |
| abs520018 | Mouse CXCL2/MIP-2 ELISA Kit | 96T |
| abs510003 | Human IL-6 ELISA Kit | 96T |
| abs510006 | Human TNF-α ELISA Kit | 96T |
| abs510002 | Human IL-1β ELISA Kit | 96T |
| abs510004 | Human IL-8/CXCL8 ELISA Kit | 96T |
| abs530003 | Rat IL-6 ELISA Kit | 96T |
| abs530002 | Rat IL-1β/IL-1F2 ELISA Kit | 96T |
HICA试剂盒:
| 货号 | 名称 | 规格 |
| abs560032 | Human IFN-γ Kit (HICA) | 500T |
| abs560027 | Human IL-10 Kit (HICA) | 500T |
| abs560029 | Human IL-12p70 Kit (HICA) | 500T |
| abs560030 | Human IL-17F Kit (HICA) | 500T |
| abs560024 | Human IL-5 Kit (HICA) | 500T |
| abs560025 | Human IL-6 Kit (HICA) | 500T |
| abs560026 | Human IL-8 Kit (HICA) | 500T |