为何收到的重组蛋白产品看着像空瓶？

由于absin蛋白的工艺原因，蛋白冻干粉产品会呈现粉末状或肉眼不易观察到的透明薄膜状、胶冻状，这些都是正常现象。

此外，在运输过程中，冻干颗粒可能会分散，并粘附于瓶壁和瓶盖。收到产品后，请按照冻干粉的重溶建议步骤，使用合适的缓冲液，重溶至说明书推荐的浓度，然后进行分装储存及使用。

具体状态可查看蛋白详情页面形态这一栏。如：abs04987

absin蛋白冻干粉溶解的方法步骤是哪些？

第1步：开盖之前一定要离心。

冻干粉在运输过程中，会因为外力的因素粘附于管壁或者管盖上面，在开盖之前，先通过离心操作，将冻干粉收集于管底，避免损失很浪费。快速离心10000-12000 rpm，30 s；若没有高速离心机，3000-3500 rpm，5 min。

第2步：离心之后，向冻干粉中加入提供的复溶buffer，用枪头轻轻吹打混匀，重悬至浓度不低于100 μg/mL。（比如规格为100 μg的重组蛋白，对应加入1 mL的复溶buffer溶解）。

A：溶解之前，一定要按照说明书上的提示，使用提供的复溶buffer重悬冻干粉。

重悬溶液的PH值和离子强度对于重组蛋白的溶解性好坏有很重要的影响；如果使用的buffer不合适，很可能产生冻干粉不能完全溶解或者根本无法溶解的现象产生，最终导致溶解之后的细胞因子或者重组蛋白活性不够或者丧失。

B：溶解之前，一定要按照说明书上的提示，溶解到指定的浓度。

按照说明书上的提示，将冻干粉稀释到指定的浓度范围，有利于维持细胞因子或者重组蛋白良好的稳定性。如果高于或者低于指定的浓度范围，一方面可能会造成细胞因子或重组蛋白的活性下降；另一方面，蛋白可能会出现聚集、导致部分蛋白未溶解，活性减弱；最后，高于指定的浓度范围，可能会超过蛋白的最大溶解度，导致蛋白无法完全溶解。

第3步：用复溶buffer直接溶解的细胞因子或重组蛋白液体可在2-8℃最长保存1周。

对于周期较短的实验（不超过7天），可以直接取该条件下保存的细胞因子或者重组蛋白溶液加入到培养体系内即可，待一周之内用完；如果实验条件设置的使用浓度低于复溶之后的溶液浓度，请用含载体蛋白进行稀释，如果稀释液不含载体蛋白，容易导致细胞因子或者重组蛋白粘附在管壁或者瓶壁上，使其在溶液中的浓度下降，进一步导致细胞因子或者重组蛋白的活性减弱。

第4步：若要长期保存，则需用含载体蛋白（0.1%的BSA或HSA）的溶液进一步稀释，然后分装冻存与-20℃至-80℃。

注意：用提供的复溶buffer溶解的冻干粉，不可直接冻存于-20℃至-80℃。因为塑料管壁对蛋白有很好的吸附作用，会导致细胞因子或者重组蛋白粘附在管壁不易分离，进而导致溶液中细胞因子或者重组蛋白的实际浓度偏低，最终导致其活性下降。而载体蛋白可以预先封闭塑料管壁上蛋白结合位点，使细胞因子或者重组蛋白不会粘附于管壁。因此长期保存，在分装冻存前，一定要用含载体蛋白的溶液进一步稀释，稀释后的浓度可为任意浓度，因大量的载体蛋白可以保证低浓度的细胞因子或者重组蛋白仍然维持较高的稳定性。

蛋白溶解说明里面备注避免剧烈振荡或移液器吹打，但是在出现空瓶的时候离心是否会对蛋白造成影响？

剧烈震荡和吹打会对蛋白造成破坏，进而影响重溶后蛋白的活性。

空瓶离心本身不属于剧烈震荡范畴，一般建议低速短暂离心（例如300×g，1min），不会对蛋白造成影响。这是重溶前的常规操作步骤，可以避免在瓶盖或者瓶壁的蛋白在开盖时洒出造成损失。

能否用PBS或者培养液DMEM溶解冻干粉？

可以的，不同的细胞因子，对应溶解液的成份不完全相同，需要根据具体情况判断是否可以用PBS或者培养基DMEM，但是如果某些冻干粉推荐的溶解液不是PBS，一定不能用PBS来溶解，否则会对细胞因子或者重组蛋白的活性造成影响。如果推荐的溶液为成份为1XPBS，则可以使用PBS来进行溶解。

做无血清培养时，或者动物体内实验时，细胞因子不能含有BSA或者HAS，要想长期保存细胞因子或者重组蛋白怎么办？

一、建议订购小包装，每次使用一支，短期内要用完。

二、用含海藻糖的溶液来稀释重悬的细胞因子或者重组蛋白，然后分装冻存。

为什么一些蛋白冻干粉产品需要在酸性缓冲液中重溶？这种缓冲液会伤害细胞吗？

为了保证蛋白冻干粉产品完全的重溶并保持活性，请使用说明书建议的缓冲液重溶并储存。因为一些蛋白质在中性pH下极其疏水，若不使用建议的缓冲液，这些蛋白质无法完全重溶，并且大部分会粘附在瓶壁。

通常重溶的储存液浓度远高于工作浓度，当蛋白储存液用于实验，可用培养基或其他合适的缓冲液将其稀释至工作浓度，这些缓冲液会缓冲痕量的酸以保证蛋白安全用于细胞。

蛋白液体和冻干粉对效期有什么影响？

absin蛋白产品，无论以液体形式还是以冻干粉形式提供，在absin网站指示的保存条件下，均保证产品的质量。通常，冻干粉形式的蛋白产品，可保存更长的时间。

细胞因子的活性单位值如何计算？

活性单位值的计算需要根据具体指标的半数有效浓度及ED50值（可诱导50%最大反应的细胞因子浓度）来计算。1个ED50就相当于1个uint。

冻干形式的重组蛋白产品到货时是室温运输，说明书显示有些蛋白应储存在-70℃ or -20℃.。这种运输方式会影响产品活性吗？

冻干粉产品在环境温度下运输，不会受到影响。absin全程启用严格的冷链运输，冷冻干燥更可以提高蛋白产品的稳定性，同时减少包装材料和运输费用。

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