小爱科普:Tris-HCl、HEPES缓冲液区别知多少
7898 人阅读发布时间:2020-11-12 11:27
| 在生物实验中经常会用到缓冲液,缓冲溶液的作用是在有限的范围内调整溶液的pH值使待测溶液的酸度符合分析方法所规定的范围。最常用到的缓冲液有很多,比如说磷酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液、HEPES缓冲液以及氨基酸缓冲液等等。不同的缓冲液差别液很大,今天就来聊聊Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液的区别。 Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液优缺点 1、Tris-HCl缓冲液 Tris缓冲液是在生物化学研究中使用较广泛的一种缓冲剂,其本身为弱碱,常用有效pH在“中性”范围,Tris-HCl缓冲液:pH=7.5~8.5;Tris-磷酸盐缓冲液:pH=5.0~9.0。 1)Tris-HCl缓冲液优点 碱性较强,可以只用这一种缓冲液配置由酸到碱的范围pH缓冲液;对生物化学过程干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。 2)Tris-HCl缓冲液缺点 pH受浓度影响较大,稀释10倍,pH变化大于0.1 温度效应大,如4℃时pH=8.4,37℃时pH=7.4 2、HEPES缓冲液 HEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH7.2~7.4范围内具有较好的缓冲能力,常用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。 1)HEPES缓冲液优点: 在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的pH值,并对细胞无毒性作用。 2)HEPES缓冲液缺点: 在高浓度时对一些细胞可能有毒,与其他缓冲剂相比价格略贵。 Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液的应用 1、Tris-HCl缓冲液 Tris是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一,其在电泳缓冲液中与甘氨酸构成缓冲体系,稳定电泳过程中的PH。此外,Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。Tris也被用作滴定标准物。作为蛋白缓冲液时,若后续工作需要质谱,则不适宜用Tris,最好换成其他质谱仪可耐受的缓冲液。 2、HEPES缓冲液 HEPES缓冲液对细胞无毒性作用,它是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的pH范围。使用时浓度为10-50mmol/L,一般培养液内含20mmol/LHEPES即可达到缓冲能力。 absin相关缓冲液:
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