Organotial子宫内膜癌类器官培养基试剂盒

子宫内膜癌类器官培养基是一种为促进人源子宫内膜癌类器官体外形成和扩增而开发的培养基。它是一种无菌的液体混合系统，含有必需和非必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质等。该培养基的独特配方可以提供一个合适的人源子宫内膜癌类器官体外培养环境，选择性地促进体外人源子宫内膜癌类器官的生长。

产品特点

• 培养简单：培养基集成多种因子，无需添加其他因子和再优化；

• 扩增效率高：培养的类器官能够快速增长；

• 维持稳定传代：维持至少 3 代以上扩增，部分类器官每次传代可实现 10 代以上扩增； 

• 高性价效益比：按照 GMP 级别生产条件下制备，批次质量稳定，价格优势明显。

试剂盒组分

使用方法

1、原代
（1）将组织放入含有特殊组织保存液F的组织取样瓶中放入冰盒4℃，拍照并登记信息。
（2）取样瓶消毒，组织放入培养皿，子宫内膜癌类器官缓冲液A清洗三次后于培养皿中剪碎，大约1mm3的组织块。
（3）癌组织用organo原代酶解液C消化，37℃震荡消化10-20 min，（消化过程中随时观察消化情况）加入三倍体积organo原代酶终止液E终止消化。
（4）使用100μm孔径的筛网进行过滤，取少量滤液在镜下进行观察，可以看到明显的组织块，将滤液收集后于300g富集离心3-5min后移去上清，重新重悬离心。
（5）去除上清，使用适量基质胶（abs9495）进行重悬(24孔板为例，每孔30ul）之后进行铺板（4℃下操作）拍照追踪定位。
（6）将铺好的板子放入37℃培养箱中10-15min成胶，添加培养基B（恢复室温）进行培养。

2、类器官传代培养
（1）移液器吸去培养基，添加4℃类器官缓冲液A放置一分钟。
（2）移液枪轻柔吹打基质胶，收集在15ml离心管中，4℃静置5min。
（3）离心5min弃去液体，添加适量类器官缓冲液A重悬移入1.5ml离心管，300g离心5min弃去液体或（添加适量消化液D作用90-120S终止，离心5min弃去混合液）。
（4）类器官收集后，添加适量类器官冻存液G，按500个/ml密度冻存（或进行步骤5）。
（5）类器官收集后，基质胶（abs9495）重悬，每孔30μl基质胶铺在24孔板中，放置培养箱中10min添加500μl子宫内膜癌类器官培养基B。

3、类器官复苏
（1）取10ml于15ml离心管中。
（2）从液氮罐中取出冻存的肿瘤类器官细胞，快速置于 37℃水浴锅中融解。
（3）水浴融解过程中，需轻轻摇动冷冻管，以确保冻存液在 1-2 分钟内完全融解。
（4）将溶解后的类器官细胞快速转移至15ml 无菌离心管，使用移液管轻轻吹打3次，300g 离心 3分钟，然后除去上清液并收集类器官细胞沉淀。添加适量子宫内膜癌类器官缓冲液A重悬移入1.5ml离心管300g离心5min。
（5）基质胶重悬，每孔20μl基质胶铺在24控板中，放置培养箱中10min添加500μl子宫内膜癌类器官培养基B。

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